Práctica 15. Realizar un banco de diluciones (libro) 08/02/2019

OBJETIVO

• El objetivo de esta práctica es preparar un banco de diluciones de 5 tubos con factor de dilución 10 y volumen final 900 μL.

MATERIALES Y EQUIPOS

Azul de metileno

Microtubos eppendorf

Gradilla

Agua destilada

Micropipeta

Puntas para micropipeta

PROCEDIMIENTO

1.  Colocamos en la gradilla 6 microtubos: 1 que sera para la solución madre, 5 numerados del 1 al 5, y un microtubo final para descartar el volumen de paso desde el microtubo número 5.
   
   
   
   
2. En el tubo para la solución madre, introducimos 1000 μL de azul de metileno. En los siguientes 5 tubos, introducimos 900 μL de agua destilada en cada uno.
   
   
   
   
   
   
   
3. Pipeteamos 100 μL (volumen de paso) desde la solución madre hasta el primer tubo y resuspendemos.
   
4. Pipeteamos 100 μL del primer tubo al segundo tubo y resuspendemos. 
   
   
   
   
5. Pipeteamos 100 μL del segundo tubo al tercer tubo y resuspendemos.   
6. Pipeteamos 100 μL del tercer tubo al cuarto tubo y resuspendemos. 
7. Pipeteamos 100 μL del cuarto tubo al quinto tubo y resuspendemos.
8. Descartamos el volumen de paso desde el tubo 5.
9. Observamos cómo el cambio en el color de las diluciones no indica la disminución en la concentración de azul de metileno. 

   

   Resultado

ACTIVIDADES 

1. ¿Cuál sería el volumen de paso si el volumen final fuera de 100 μL?

 

1. Solo disponemos de 100 μL de solución madre, diseñad un banco de diluciones para poder obtener una muestra diluida al 1:64.